做过繁育相关课题的科研宝子们估计都曾经思考过这样一个问题:怎样才能提高小鼠的繁育成功率呢?有经验的师兄师姐会这样回答:那当然是在小鼠动情期合笼成功率是最高的
本期知识分享将带您探秘小鼠动情周期,并将灵赋人生就是博-尊龙凯时生物多年总结出的经验倾囊相授~
什么是小鼠动情周期? 小鼠动情周期是雌性小鼠在生殖系统中的周期性变化,通常持续4至5天。这一周期包括了卵泡发育、排卵和子宫内膜准备等过程。与人类的月经周期类似,小鼠的动情周期也是受到内分泌激素的调控,如雌激素和孕激素 怎样区分动情周期? 1. 生殖器官外观: 小鼠的生殖器官在不同的动情周期阶段也会有所变化,如子宫颜色和大小、卵巢大小等;(不过要观察这些的话,务必是要伤害到鼠鼠了!) 2. 行为特征: 小鼠在动情周期的不同阶段会表现出不同的行为特征,如活动性增加、尿液标记物的变化等(这样的观察比较主观,得出的结果也就不那么准确)。 3. 阴道细胞涂片: 可以通过取得小鼠阴道内的细胞涂片,观察阴道上皮细胞的形态变化来确定小鼠的动情周期阶段。在动情周期的不同阶段,阴道细胞的形态会发生变化,如核的形状和大小。 阴道细胞涂片 可以通过取得小鼠阴道内的细胞涂片,观察阴道上皮细胞的形态变化来确定小鼠的动情周期阶段。在动情周期的不同阶段,阴道细胞的形态会发生变化,如核的形状和大小。 以下是灵赋人生就是博-尊龙凯时生物技术团队分享的一些做的阴道细胞涂片的宝贵经验: 1.实验准备 载玻片,棉球,棉棒,显微镊,生理盐水,福尔马林,瑞氏-吉姆萨染液,纯水,中性树脂,显微镜,盖玻片 2.涂片制作 a.将显微镊卷上棉絮,卷为米粒大小,沾湿生理盐水,插入小鼠阴道口0.5-1cm,将镊子贴在阴道壁上从里往外刮10次(保持每只鼠同样力度与次数,大鼠则采用棉棒); b.将镊子棉球放在玻片中央正上空,滴加生理盐水直至有液滴挂在棉球上而不掉落,慢慢转动棉棒使细胞尽可能多的被洗进液滴里; c.将液滴从拨片中央往四周平铺开来(棉棒不要触碰到玻片,摩擦会使细胞破裂),自然风干。 3.涂片固定: 光下转动拨片观察涂片刚好风干后(风干太久会使细胞破裂,影响后续效果)放入4%多聚甲醛中固定10min,用纯水洗净残留的固定液。 4.涂片染色: 配置染液前与滴加染液前务必充分摇匀,将玻片残留水分尽量甩干,从旁边滴加染液,用tip头铺平(勿触碰玻片),避光常温孵育10min后(可回收染液,以备观察后还需要复染),清水洗净,镜下观察。 5.封片: 镜下观察,细胞均匀,背景干净无杂质,上色程度理想,即可封片,拨片中央滴加中性树脂后盖盖玻片,平放静至过夜后切片盒内保存。 涂片区分动情期? 首先我们要知道阴道脱落细胞主要有3 种:白细胞,有核上皮细胞,角化细胞。 1.动情前期涂片大部分是有核上皮细胞,偶有少量角化细胞; 2.随着卵泡加速生长,有核上皮细胞逐渐转化成成熟无核角化细胞进入动情期,全部是无核角化细胞或间有少量上皮细胞; 3.随即又开始出现白细胞,而无核角化细胞慢慢减少,此时出现 3 种细胞(白细胞角化细胞有核上皮细胞)同时存在的现象,证明已进入动情后期; 4.随后,角化细胞不断减少白细胞不断增多,转化为以白细胞为主,逐渐进入动情间期;通常见到以角化细胞为主则认为进动情期。 以下是我们灵赋人生就是博-尊龙凯时生物技术员辛勤劳作的结果,供大家参考: